以CP23重组蛋白为抗原建立检测微小隐孢子虫抗体间接ELISA方法的研究

摘要：以在E.coli高效表达的微小隐孢子虫子孢子表面抗原CP23为抗原，以辣根过氧化物酶(HRP)标记的山羊抗鼠IgG为二抗，建立了检测微小隐孢子虫抗体的间接ELISA方法。经检测筛选出最佳反应条件为1μg／孔纯化的E.coli表达的CP23抗原包被酶标板，用10％免血清进行封闭，以正常E.coli裂解上清液稀释待检血清。实验表明应用CP23重组蛋白作为诊断C.parvum抗原具有特异性高、抗原易纯化和成本低等特点。     

宰前运输对肥育猪胴体、内脏及肉质的影响

本试验对 1 0头宰前运输应激的大长淮 (大白×长白×淮猪 )肥育猪 (试验组 )和5头宰前无应激的大长淮肥育猪 (对照组 )作了胴体、内脏及肉质测定。试验组与对照组在胴体性状和内脏重量 (心脏除外 )方面无显著差异。应激组和对照组的肌肉 p Hu和肉色评分分别为 5.50 ,2 .2 5和 5.88,3 .0 0 ,差异显著 (P<0 .0 1 )。试验组肉质有下降趋势。     

番鸭在南京地区的适应性观察

番鸭在南京地区进行冬、夏两批饲养,均有较强的适应性。试验结果表明:冬、夏两 批饲养的番鸭只平均重量差异不显著(P>0．05)。夏季与冬季的料重比分别为1:2．62和1: 3．07,冬季饲养的鸭子饲料利用率低,料重比大于夏季。冬季在塑料大棚中饲养番鸭精饲料减 少1／3,添加青粗饲料能达到同样的增重效果。温度与增重无相关关系,相对湿度与番鸭的增 重呈负相关(P<0．01)。鸭舍内平均温度在11．05℃-30．93℃之间,相对湿度在76．28％以 下,番鸭能正常生长发育。环境温度在9．8℃以下,番鸭的生长发育受阻,饲料利用率降低。相 对湿度在77％以上,其增重受到影响。特别在低温高湿的环境中,严重地影响番鸭的生长。在 相同的饲养期内,周平均温度9．8℃,平均相对湿度91％,番鸭周平均增重22 g,周平均温度 27．42℃,平均相对湿度71．29％,番鸭周平均增重355 g,相差333 g(P<0．01)。     

Relation between TNF-α,TNFR I expression and apoptosis in oral lichen planus

AIM: To examine the expression and distribution of tumor necrosis factor-α (TNF-α), tumor necrosis factor receptor I (TNFR I) and apoptosis in oral lichen planus, and evaluate their roles and relation in the oral lichen. METHODS: Immunohistochemical technique and TUNEL were employed to study the expression of TNF-α, TNFR I and apoptosis in 50 cases of oral lichen planus and 10 normal oral mucosa specimens. RESULTS: Compared with the normal control group, TNF-α expression was upregulated in mononuclear cells in lamina propria and decreased in keratinocytes in oral lichen planus lesion (P<0.05). On the contrary, TNFR I expression was increased in keratinocytes and decreased in lamina propria in oral lichen planus lesion (P<0.05). The increased apoptosis index in keratinocytes and the decreased apoptosis index in lamina propria were found in oral lichen planus (P<0.05). CONCLUSION: The accelerated apoptosis of keratinocytes and the inhibition of lymphocytes apoptosis may contribute to the formation and progression of oral lichen planus.     

Chloride channels of platelets

Chloride channels distribute widely in the body, and participate in many physiological actions and regulatory processes. Based on their physiological roles and molecular structures, six kinds of chloride channels have been identified: (1) The chloride channels family; (2) Cystic fibrosis transmembrane conductance regulator; (3) Swelling-activated chloride channels; (4) Calcium-activated chloride channels; (5) The p64 (CLIC) gene family; (6) γ-aminobutyric acid and glycine receptors. The chloride channels do exist in platelets, and their appearances are dependent on the presence of intracellular calcium. Blocking agents of chloride channels inhibit the thrombin-activated platelet aggregation and the elevation of the intracellular calcium concentration in a dose-dependent manner. It is suggested that chloride channels play a role in the activation of platelets. In addition, chloride channels act on both the cell volume regulation and the intracellular pH regulation in platelets.     

H5N1亚型禽流感病毒核蛋白基因的克隆及分子进化分析

用RT-PCR法,以1株h5N1亚型禽流感病毒RNA为模板,扩增了NP全基因cDNA.将cDNA克隆于pMD18-T载体,并对其进行测序.测序结果表明所克隆的1542个核苷酸的片段包含了核蛋白完整阅读框架,其中编码区为1497个核苷酸,编码498个氨基酸.将其序列与6株A型流感病毒NP基因序列进行比较,各毒株之间NP基因核苷酸序列同源性为92.5%～95.9%,编码的氨基酸同源性为97.0%～98.4%.本研究通过分子进化分析揭示了各毒株间的亲源关系.     

匍匐翦股颖草坪根系对城市生活污水的净化效应

针对匍匐翦股颖草坪根系对生活污水的净化效应进行了初步的探索,结果表明,城市生活污水能显著促进匍匐翦股颖地上部分叶片的生长,其叶片生长量随着其处理的进程而逐渐增加,至第6周时叶片生长量比净水灌溉的对照增加了75.6%;根系生长在污水灌溉与净水灌溉之间未显示出明显的差异;匍匐翦股颖草坪根系对生活污水中总氮(TN)、总磷(TP)、化学耗氧量(CODCr)的去除率分别达到了71.0%、53.1%、82.8%,而无草坪的裸土对TN、TP、CODCr的去除率只有24.6%、13.0%、44.2%.结果显示了匍匐翦股颖草坪根系对生活污水有着较好的净化效果,有望在城市生活污水处理中应用.     

猪多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及生物学特性研究

用PCR方法配合生化鉴定，从有肺炎症状猪的肺脏及进行性萎缩性鼻炎(Progressive atrophic rhinitis，PAR)症状猪的鼻拭子中分离出66株多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida，Pm)。然后做了药敏试验，并用PCR方法对这66株Pm进行分型及毒素基因的检测，用豚鼠皮肤坏死试验及小鼠致死试验对产毒素多杀性巴氏杆菌(Toxigenie Pasteurella multocida，T^ Pm)进一步鉴定。结果显示PCR鉴定与生化鉴定Pm结果完全一致；PCR分型表明有46株为D型Pm，18株为A型：Pm，1株为B型Pm，1株无法定型；有8株用PcR检测为T^ Pm；豚鼠皮肤坏死试验及小鼠致死试验对这8株T^ Pm的进一步鉴定也表明均为产毒素菌株。所鉴定的8株T^ Pm都为D型，都分离于有严重PAR症状的猪。     

鸡呼吸道传染病基因芯片诊断方法的建立

随着养禽业集约化程度的不断提高,鸡呼吸系统疾病的发生呈逐年上升趋势.而且大多数的呼吸道疾病不是单一病原感染,而是多种病原混合感染,从临床上难以及时鉴别诊断,延误防治时机,从而给养禽业造成巨大的经济损失.因此,禽呼吸道疾病已经成为生产和研究中的一类重要疾病.目前,禽呼吸系统疾病的诊断方法主要有病毒分离、血凝（HA）、血凝抑制（HI）、琼脂扩散、ELISA、PCR等,但是传统的检测方法灵敏度较低,而且当病原发生变异或感染禽处在潜伏期时会造成误诊.PCR方法每次只能检测一种病毒,费时费力.采用基因芯片的方法可以快速、准确地同步检测多种病原体,且需要样品量少、灵敏、特异、快速、费用低廉,将生物芯片技术用于禽呼吸道疾病诊断意义重大.     

枯草杆菌的淀粉酶基因在大肠杆菌中的表达

根据枯草杆菌(Bacillus subtilis)基因文库中的淀粉酶基因的碱基序列,设计引物。以枯草杆菌菌体DNA为模板,利用PCR扩增出分子量大约为2.3 kb的淀粉酶基因片段。借助于核酸内切酶和连接酶把该基因植入到pHMSXD1质粒中,构建pHMSXD2质粒载体。通过高压电击处理把载体植入到大肠杆菌(JM10)中并成功表达。该株大肠杆菌在酶基因表达后,其淀粉酶活力达到1.037 6 U/mL(LB培养液)和1.361 0 U/mL(矿物元素培养液),分别比原始的枯草杆菌的淀粉酶活力提高了46倍和286倍。